關於細(xì)胞(bāo)融合(hé)技術(shù)的(dí)介紹
點擊次數:2252 更新時(shí)間:2021-08-27
細(xì)胞(bāo)融(róng)合(hé)儀,也(yě)叫電融(róng)合(hé)儀(yí)。比(bǐ)較(jiào)適合用(yòng)在細(xì)胞雜交,細(xì)胞融(róng)合,可在倒(dǎo)置(zhì)顯(xiǎn)微鏡下(xià)直接觀察(chá),可以用在微生物學(xué),動物醫(yī)學(xué),生物工程(chéng)等(děng)方麵的研究(jiū)。與(yǔ)普通(tōng)的(dí)化學融(róng)合(hé)方(fāng)法(fǎ)比起來,它使用(yòng)的時候對(duì)細(xì)胞(bāo)沒(méi)有毒(dú)性(xìng),有較高的融合效率,更加的(dí)方便快速等(děng)特(tè)點都(dū)是(shì)比(bǐ)較明(míng)顯的(dí)。
細胞(bāo)融合(cellfusion)或細胞雜交(jiāo)(cellhybridization)是指真核細(xì)胞通(tōng)過(guò)介(jiè)導和培(péi)養(yǎng),兩個或(huò)多(duō)個細胞(bāo)合並成(chéng)一個(gè)雙(shuāng)核(hé)或多核細胞的過(guò)程(chéng)。人工的細胞(bāo)融合開(kāi)始(shǐ)於(yú)20世紀50年(nián)代,60年代到70代作(zuò)為一(yī)門新興的技術,發(fā)展(zhǎn)非常(cháng)快(kuài),應用範圍(wéi)也極為廣(guǎng)泛(fàn),除(chú)了(liǎo)同種(zhǒng)類細(xì)胞(bāo)間可以融(róng)合(hé),種(zhǒng)間(jiān)遠(yuǎn)緣(yuán)細胞(bāo)也(yě)能(néng)融(róng)合,細胞與組織不同,不(bù)排斥異類,異種(zhǒng)細胞(bāo),動物(wù)細胞(bāo)如此,植(zhí)物細胞(bāo)也是(shì)如此。基(jī)因(yīn)型(xíng)相同的(dí)細(xì)胞(bāo)融合(hé)成的雜交細胞稱為同核(hé)體(tǐ)(homokaryon);來(lái)自不(bù)同基因(yīn)型的(dí)雜交細胞(bāo)則(zé)稱為(wéi)異核(hé)體(heterokaryon)。
細胞融合的(dí)原理(lǐ):
首先(xiān),通(tōng)過雙向(xiàng)電(diàn)泳(yǒng)使(shǐ)細胞間的(dí)接(jiē)觸(chù)變(biàn)得(dé)非常(cháng)緊急(jí)。普通(tōng)電泳采(cǎi)用(yòng)直流(liú)電來(lái)移(yí)動分子(zǐ),雙向電泳則與(yǔ)之不同,采(cǎi)用了(liǎo)高(gāo)頻交流電。在活(huó)細胞等微(wēi)粒(lì)的(dí)內部(bù),誘導(dǎo)去極化(huà),引(yǐn)起細胞(bāo)聚集(jí),排(pái)列(liè)成串珠狀(zhuàng),互相緊(jǐn)密(mì)接觸(chù)。
然後給(gěi)予短暫的(dí)高壓(yā)脈衝(chōng),引起細(xì)胞膜的穿(chuān)透,隨後細(xì)胞膜發(fā)生結合(hé)導(dǎo)致細胞融(róng)合。為了(liǎo)穩定這(zhè)個過程,在短期內需(xū)要施(shī)加交流(liú)電壓(yā)。
剛(gāng)完(wán)成的電(diàn)融合的融合細胞可稱為異核體,因為(wéi)盡管表麵的(dí)細胞膜已經發生了融(róng)合(hé),細(xì)胞內(nèi)仍(réng)可(kě)以看到兩(liǎng)個(gè)或兩個(gè)以上的細胞(bāo)核。隨後,細(xì)胞核也(yě)會(huì)細(xì)胞內部(bù)發生融(róng)合(hé)。在多(duō)數情(qíng)況下,該過程(chéng)會導致(zhì)核(hé)中的染(rǎn)色體(tǐ)數量急(jí)劇(jù)下降(jiàng)。