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動物(wù)實驗(yàn)結束後,為了減輕動(dòng)物的(dí)疼(téng)痛(tòng)及痛(tòng)苦,此時從(cóng)人道(dào)主(zhǔ)義的觀(guān)點(diǎn)出(chū)發可以(yǐ)對這(zhè)些動物(wù)實施安(ān)樂死(sǐ)(Euthanasia)。實施安(ān)樂死時(shí)有一些特殊(shū)的要(yào)求需(xū)要考慮(lǜ),重(zhòng)要的是(shì)安樂死的(dí)方法(fǎ)必須人(rén)道(dào)。動物(wù)實驗(yàn)中,有時(shí)為了獲(huò)得動物組織器(qì)官進行(háng)研究,需要處死動物(wù),安樂死(sǐ)的(dí)方法應該對動物(wù)的組(zǔ)織器(qì)官的研(yán)究沒有(yǒu)影響(xiǎng)。另外(wài),實(shí)施安(ān)樂死的(dí)方法還(huán)要(yào)可靠,有效,經(jīng)濟(jì),容易實施,對實驗人員必(bì)須安(ān)全。
本文(wén)對(duì)實(shí)驗動物安樂死技(jì)術(shù),《指南(nán)》對我國實驗(yàn)動物(wù)安樂死處(chǔ)理有什(shí)麼(mó)啟發(fā)和指(zhǐ)導(dǎo)作用,實(shí)驗動物安樂死(sǐ)涉及的福利(lì)指標(biāo),實驗動物(wù)安樂死(sǐ)對(duì)提升(shēng)動物(wù)福利倫理(lǐ)作(zuò)用等(děng)內容(róng)進行了(liǎo)詳細講(jiǎng)解(jiě)。文(wén)末附(fù)動(dòng)物安(ān)樂死(sǐ)工(gōng)作工(gōng)作(zuò)站(zhàn)購(gòu)買鏈(liàn)接(jiē)。
從(cóng)大(dà)的(dí)背(bèi)景來(lái)說(shuō),當時實驗動物安(ān)樂死的理(lǐ)念在(zài)我國已(yǐ)被逐步認(rèn)可(kě),相(xiāng)關(guān)的法(fǎ)規要(yào)求和(hé)標準(zhǔn)已逐步發布(bù);同(tóng)時因(yīn)合作的進一(yī)步加強,無論是科研(yán)項目(mù)合(hé)作還(huán)是(shì)發表學(xué)術論文,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(wù)anlesi都(dū)已成(chéng)為實(shí)驗動(dòng)物福利倫(lún)理(lǐ)的關鍵(jiàn)問題。但實際工(gōng)作(zuò)中(zhōng)究竟該(gāi)如何(hé)選(xuǎn)擇和(hé)實(shí)施(shī)anlesi才符合(hé)國內和(hé)要求(qiú)?這成(chéng)為(wéi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(wù)從(cóng)業人(rén)員和科(kē)研人(rén)員(yuán)麵臨的(dí)問題。
目(mù)前(qián)實(shí)驗動(dòng)物(wù)anlesi在(zài)我國也開始(shǐ)得到重(zhòng)視(shì),近幾年(nián)發(fā)布的多(duō)項國標均(jūn)對實(shí)驗(yàn)動物anlesi提出具體要(yào)求,包括(kuò)《實(shí)驗(yàn)動物福利倫理審查指南》(GB/T 35892-2018),《實驗(yàn)動物機構 質量和能(néng)力的通用(yòng)要(yào)求》(GB/T 27416-2014),《實驗動物(wù)福(fú)利(lì)倫理(lǐ)審查(chá)技術規範》(DB11/T 1734-2020)等。在實驗(yàn)動物機構(gòu)認(rèn)可工作中,所有的(dí)機構已將實驗(yàn)動(dòng)物anlesi作為重點工(gōng)作落實,基本可以(yǐ)按(àn)照動物種類(lèi),動物(wù)年(nián)齡及實驗要(yào)求(qiú)等,選擇適合的方式實施(shī)anlesi。國內設備廠商也(yě)開(kāi)始(shǐ)生(shēng)產(chǎn)實驗動物anlesi設(shè)備包括二氧化碳(tàn)anlesi儀(yí)等。實驗(yàn)動(dòng)物(wù)anlesi實(shí)施推(tuī)進很快(kuài)。
與歐(ōu)美(měi)等國家相比,我(wǒ)國(guó)在(zài)實驗動(dòng)物安樂(lè)死(sǐ)的(dí)研究和(hé)實施發展進程(chéng)方麵,仍存在(zài)一定差(chà)距。美國,英國(guó),加拿(ná)大(dà)等(děng)國家(jiā)均有(yǒu)專門(mén)針對實驗(yàn)動物anlesi的(dí)法規(guī)要(yào)求,技(jì)術(shù)指南,對(duì)anlesi方法(fǎ)的(dí)實施(shī)條件(jiàn),操(cāo)作細(xì)節(jié)有更嚴(yán)格的規(guī)定和(hé)要求(qiú),在這方麵我(wǒ)國還存(cún)在差(chà)距(jù)。其次(cì),在(zài)實(shí)驗動(dòng)物(wù)anlesi方(fāng)法(fǎ)的(dí)評估,新安樂死(sǐ)方法的(dí)研究方麵(miàn),我國(guó)還需進(jìn)一步加強(qiáng)。該部(bù)分涉及動物(wù)痛苦水(shuǐ)平的(dí)評(píng)估,可(kě)用(yòng)於(yú)anlesi藥/物(wù)或方法(fǎ)的(dí)尋找及(jí)安(ān)樂死設備的研發等內(nèi)容(róng)。實驗動(dòng)物anlesi實施的(dí)監(jiān)督需(xū)進一(yī)步(bù)加強,包括機(jī)構內(nèi)部獸(shòu)醫的監督(dū),IACUC的(dí)監(jiān)督及實(shí)驗動物管(guǎn)理(lǐ)或(huò)認可機構(gòu)的(dí)檢(jiǎn)查。
anlesi是非(fēi)常重要(yào)的(dí)動(dòng)物福利指標,具體來說(shuō),實驗動物(wù)anlesi涉及的福利(lì)指(zhǐ)標包括哪些?我(wǒ)國目前出(chū)台(tái)了哪(nǎ)些(xiē)與(yǔ)動物(wù)福(fú)利倫(lún)理相關的(dí)指導(dǎo)政(zhèng)策或(huò)標準?實(shí)驗動物(wù)anlesi對(duì)提(tí)升(shēng)動物福利(lì)倫理水平表現(xiàn)在(zài)哪些方麵(miàn)?
實(shí)驗(yàn)動物安(ān)樂(lè)死涉及的福(fú)利指標包括以(yǐ)下幾類(lèi):動(dòng)物(wù)行為研究,包括(kuò)厭(yàn)惡(è)感實(shí)驗,喜好實(shí)驗(yàn)等;神經(jīng)係(xì)統(tǒng)研究(jiū),包括監(jiān)測(cè)動物(wù)腦(nǎo)電圖(tú)(EEG)和(hé)腦皮層(céng)電(diàn)圖(tú) (ECoG);觀察(chá)動(dòng)物身(shēn)體反射,如強直(zhí)-陣攣(luán)發作(zuò)等(děng);檢(jiǎn)測動物(wù)生理學(xué)指(zhǐ)標,包(bāo)括動物(wù)心率,血壓(yā)和(hé)皮(pí)質醇水(shuǐ)平(píng)等(děng)。
目(mù)前我國出(chū)台的(dí)動(dòng)物(wù)福(fú)利倫(lún)理(lǐ)相(xiāng)關的指導(dǎo)政策和標準有:《關於(yú)善待實驗動物(wù)的指導性意見(jiàn)》(國(guó)科發財字(zì)〔2006〕398號),,《實驗動(dòng)物(wù)福利(lì)倫理審查(chá)指南(nán)》(GB/T 35892-2018),《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(wù)機構(gòu) 質(zhì)量和(hé)能(néng)力(lì)的通用(yòng)要(yào)求(qiú)》(GB/T 27416-2014),《實(shí)驗(yàn)動物福利(lì)倫理審(shěn)查(chá)技(jì)術規範(fàn)》(DB11/T 1734-2020),《動物實(shí)驗(yàn)人(rén)道終點(diǎn)評(píng)審(shěn)指南(nán)》(RB/T 173-2018),《實驗動物(wù)anlesi評審指南(nán)》(待(dài)發布(bù)),《實驗動物(wù)運(yùn)輸(shū)通用(yòng)規(guī)範》(待發(fā)布(bù))。
常(cháng)用的實(shí)施安樂死的方法(fǎ)可分為兩大(dà)類:藥(yào)/物(wù)化學法和機械物理(lǐ)法
1.化(huà)學藥/物(wù)法(fǎ)
是指用(yòng)一種藥(yào)/物(wù)或其他化合物處(chǔ)死(sǐ)動物。常用的是(shì)使(shǐ)用(yòng)過(guò)量(liáng)的(dí)全身(shēn)麻(má)醉劑,使動物心(xīn)跳停(tíng)止(zhǐ),呼(hū)吸衰竭而死亡(wáng)。戊巴/比妥相(xiāng)對(duì)來(lái)說(shuō)作(zuò)用(yòng)迅速,給(gěi)藥(yào)簡(jiǎn)單,價格低廉(lián),是常用的(dí)實施(shī)anlesi選擇的藥/物,腹腔(qiāng)或(huò)靜脈注(zhù)射過(guò)量的戊巴/比妥(100~150mg/kg)即(jí)可。巴比/妥酸鹽可(kě)致(zhì)血(xiě)管(guǎn)擴張,引(yǐn)起(qǐ)器官淤血,可能影響組(zǔ)織(zhī)學研究(jiū)。
用於安(ān)樂死(sǐ)的(dí)吸入麻(má)醉劑(jì)有,氟烷(wán),恩氟烷和異氟(fú)烷等。CO2也(yě)常被用(yòng)做安(ān)樂(lè)死的吸(xī)入劑。將動物放置(zhì)含(hán)有(yǒu)100%CO2的(dí)環境中,很(hěn)多種(zhǒng)動物(wù)就(jiù)產生嚴(yán)重的呼(hū)吸困難(nán)而死亡。用這種(zhǒng)方(fāng)法(fǎ)處死(sǐ)動物時(shí),動物意識清(qīng)醒(xǐng),能(néng)感受到痛苦,不是理想的方(fāng)法(fǎ)。如(rú)果將動物(wù)放(fàng)置在一(yī)定(dìng)濕(shī)度,C02和(hé)O2的比例為(wéi)6:4的混(hùn)合氣(qì)體環(huán)境中(zhōng),等動物(wù)逐漸喪(sāng)失意識(shí)後(hòu),將(jiāng)CO2濃度升至100%,在至少(shǎo)保持10min以(yǐ)確定動(dòng)物死亡(wáng),這時,動物(wù)*是(shì)在無意(yì)識狀(zhuàng)態下死亡(wáng)的,死(sǐ)亡(wáng)需30~60min,如(rú)果時間太(tài)長(cháng),則不是優(yōu)先(xiān)的方法(fǎ)。CO2等吸入劑能誘(yòu)發(fā)動物肺(fèi)水腫,可能影(yǐng)響其後研究中對動物組織器(qì)官(guān)的利(lì)用。
2.機械(xiè)物理(lǐ)法(fǎ)
大(dà)多(duō)數(shù)的藥/物化學(xué)法存(cún)在(zài)著潛(qián)在幹擾某(mǒu)些實驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的可(kě)能性,所(suǒ)以利用(yòng)機械(xiè)物(wù)理法實施(shī)anlesi可能(néng)更適合動物(wù)處死後利用(yòng)某些特(tè)定(dìng)的組(zǔ)織(zhī)器官進行(háng)生(shēng)物化學或組(zǔ)織學(xué)檢查。如果(guǒ)有(yǒu)可能(néng),在(zài)應(yīng)用(yòng)機械物理(lǐ)法處死動物時(shí),應(yīng)盡(jìn)可能(néng)使(shǐ)用(yòng)一些(xiē)鎮/靜劑(jì)或(huò)麻醉劑。所有的(dí)機(jī)械物理法都可能對(duì)動物造成(chéng)痛(tòng)苦(kǔ)。所以在挑(tiāo)選(xuǎn)一種anlesi的方法時(shí),應當考(kǎo)慮(lǜ)到這一點(diǎn)。機械物理法(fǎ)包(bāo)括斷頭術(shù)(Decapitation)和(hé)頸椎脫臼術(shù)(Dislocation of cervical vertebra)。斷頭術(shù)和頸椎(zhuī)脫臼術(shù)適合於(yú)小(xiǎo)鼠(shǔ),大鼠,倉鼠(shǔ),沙鼠(shǔ),小狗(gǒu),小(xiǎo)貓(māo)和(hé)小鳥,並不(bù)適宜(yí)於大動(dòng)物(wù)。如(rú)果(guǒ)機械物理(lǐ)法能被快速,專業地(dì)完(wán)成,就不(bù)會(huì)給動物帶來(lái)疼痛(tòng)。實施(shī)機械(xiè)物理(lǐ)法後,應給動物放血(xiě)或(huò)損(sǔn)毀大腦(nǎo),確保動物(wù)死亡。
對(duì)於(yú)新生的動物和體重小於20g的動物,可以把它們(mén)浸入液氮中(zhōng)迅速(sù)冷凍(dòng)來實(shí)施anlesi。這種方(fāng)法能否(fǒu)使動(dòng)物快(kuài)速喪(sāng)失(shī)意識還(huán)受到一(yī)些人(rén)的(dí)質疑。另(lìng)一種替(tì)代方(fāng)法是對(duì)動(dòng)物的中/樞(shū)神經(jīng)係(xì)統(tǒng)進行微(wēi)波(bō)照射,使動(dòng)物立刻(kè)死亡,動物的(dí)組織(zhī)器(qì)官生化特性(xìng)不發生改變。如果(guǒ)使用微(wēi)波,必須(xū)有(yǒu)相應的設備(bèi)。
對(duì)於大(dà)型(xíng)的實施(shī)動物(wù),如體(tǐ)型(xíng)較(jiào)大的犬(quǎn),豬,反芻(chú)動物(wù),馬(mǎ)等,可以先(xiān)麻(má)醉(zuì),使(shǐ)其(qí)喪(sāng)失意(yì)識,然後(hòu)切(qiē)斷其(qí)頸總動脈放(fàng)血(xiě),使之立即(jí)死亡(wáng)。
雖然在今(jīn)天(tiān)的(dí)科學(xué)技術(shù)下,我們還不得(dé)不依(yī)靠動物實驗來積累臨床經驗(yàn),但我(wǒ)們(mén)明(míng)白(bái),人(rén)和地(dì)球(qiú)上(shàng)的所有(yǒu)動物和(hé)諧發(fā)展才是(shì)自然賦(fù)予(yú)地球生(shēng)命的(dí)意義。讓(ràng)我們(mén)對實驗動物致以(yǐ)無限敬意(yì),在心(xīn)中為它們默(mò)默慰(wèi)問。
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